Vabade radikaalide ja antioksüdantide süsteemide vahelise õige tasakaalu säilitamiseks on oluline, et keha oleks pidevalt tagatud piisava hulga antioksüdantsete omadustega molekulide väljastamisega, et vältida looduslike kaitsemehhanismide tekkimist radikaalide vastu, mis on antioksüdandi barjääri poolt. jättes biomolekulid kokku reaktiivsete liikide agressiooniga, mis ohustab nende funktsionaalsust.
Antioksüdeeriva toimega molekulid, mida võib toiduga kaasa võtta nende ainetega rikaste toiduainete tarbimise kaudu või sihipärase lisamise kaudu, hõlmavad mitmeid polüfenoole, vitamiine, karotenoide ja paljusid teisi aineid. Need ühendid on võimelised reageerima vabade radikaalidega, vähendades nende reaktiivsust ja tekitades vähem ohtlikke molekule, mida keha kergesti kõrvaldab.
Samuti on oluline arvestada, et antioksüdandid toimivad erineva mehhanismiga ja erineva efektiivsusega sõltuvalt reaktsioonis sisalduva radikaali tüübist. Iga antioksüdant on tegelikult võimeline teostama oma kontrastset tegevust mõne konkreetse radikaaliga, seega on vajalik, et eksogeensete antioksüdantide tarnimine oleks võimalikult mitmekesine, nii et erinevad molekulid võivad toimida täiendavalt või sünergia biomolekulide kaitsmisel erineva iseloomuga radikaalsete liikide poolt põhjustatud oksüdatsiooni eest.
Seoses sellega on uuringu keskmes olnud nende mehhanismide uurimine, millega antioksüdandid rakke kaitsevad. Eriti oluline on toitumisega kaasnevate antioksüdantide koguse või antioksüdandi barjääri efektiivsuse mõõtmise võimalus, et oleks võimalik sihipäraselt korrigeerida riskantseid olukordi.
Peamine raskus aine antioksüdantide efektiivsuse mõõtmisel tuleneb asjaolust, et oksüdatiivse stressi määramisel osalevad vabad radikaalid on arvukad ja reageerivad erinevate kiiruste ja mehhanismidega biomolekulidega. Vabade radikaalide erineva olemuse tõttu on äärmiselt raske kindlaks teha analüüsimeetod, mis võimaldab ühemõtteliselt mõõta ühendi võimet reageerida reaktiivsete liikide oksüdeerivale toimele, eriti kui tegemist on keeruliste maatriksitega, nagu näiteks veri, toit või taimeekstraktid. Tegelikult erinevad vabad radikaalid reaktiivsuses, sihtmärk-biomolekuli tüübis, bioloogilises maatriksis, milles nad toimivad, ning keemilis-füüsikalises afiinsuses (lipofiilne või hüdrofiilne keskkond), samuti mehhanismis, millega need tekivad.
Lisaks on erinevate ainete mõõdetud andmete võrdlemiseks oluline püüda standardida võimalikult palju kasutatud meetodeid. Ideaalne analüütiline meetod peaks kõigepealt olema lihtne ja kergesti reprodutseeritav, et tagada tulemuste hea korratavus. Lisaks sellele tuleks kasutada olulisi bioloogilisi radikaale, mis reageerivad selgete ja tuntud mehhanismidega, et simuleerida võimalikult palju in vitro, mis toimub kehas, minimeerides häireid. Lõpuks peaks ideaalne hüdrofiilsete ja lipofiilsete ainete mõõtmiseks olema ideaalne analüüs.
Praegu ei ole ühtegi kehtivat meetodit ühendi antioksüdantse võimsuse mõõtmiseks, mis vastab kirjeldatud omadustele. Seetõttu on kompromissi saavutamiseks vaja kasutada mitmete mehhanismide ja erinevate radikaalsete liikide esseede tulemuste kombinatsiooni, mis võtab arvesse ka tulemuste lõppkasutust.
Teha kindlaks, mida me soovime mõõta ja miks see on oluline mitte ainult sobivate mõõtmismeetodite valimiseks, vaid ka kõige sobivama ekstraheerimisprotokolli kasutamiseks, kuna antioksüdandid esindavad väga suurt hulka ühendeid, millel on väga erinevad keemilised ja füüsikalised omadused. ja puuduvad ekstraheerimismeetodid, mis on võimelised ekstraheerima kõiki keerulises maatriksis esinevaid antioksüdante, vähendades samal ajal võimalike häirivate ainete olemasolu, mis võivad tulemusi moonutada.
ANALÜÜSIMEETODID
Kõige otsesem viis hinnata ühendi võimet kaitsta rakke ja kudesid oksüdatiivse stressi eest on mõõta vere antioksüdantide võimet pärast ühendi enda võtmist, st tõhusust antioksüdandi barjääri tugevdamisel, mis hõlmab kõiki \ t antioksüdantide sisaldus veres. Välja töötatud testidel on üldiselt väga spetsiifilised omadused ja nad suudavad mõõta teatud tüüpi antioksüdandi toimet täpselt määratletud tingimustes. Kuid erinevad vere antioksüdandid ei toimi eraldi, vaid teostavad rangelt omavahel seotud meetmeid, et luua sünergia, mis võimaldab saada optimaalset kaitset vabade radikaalide agressiooni vastu. Seetõttu ei saa kogu antioksüdantide võimsuse tegelikku mõõtmist vähendada üksikute komponentide antioksüdantide võime summani ja on võimatu määrata ühe antioksüdandi süsteemide üldist toimet bioloogilistes vedelikes ühe analüüsi abil.
Alternatiivne viis on toitaineid (toidud ja toidulisandid) sisaldavate eksogeensete ainete antioksüdantvõime in vitro mõõtmine. Antud juhul tuleb siiski meeles pidada, et see on ühendi antioksüdantide potentsiaali näitaja, mis annab vaid ligikaudse hinnangu selle võimele avaldada bioloogilistes ruumides vabade radikaalide agressiooni vastu tõelist kaitset, kuna see hindab kvantitatiivselt esinevad antioksüdandid, kuid ei anna mingit teavet nende biosaadavuse ja nende efektiivsuse kohta pärast kehasse sisestamist.
Antioksüdandi läbilaskevõime mõõtmise meetodeid võib jagada kahte kategooriasse, mis põhinevad mehhanismil, mille abil nad reageerivad vabade radikaalidega nende reaktiivsuse inaktiveerimiseks:
- HAT (vesiniku aatomi ülekanne) meetodid, mis põhinevad aine võimel avaldada oma antioksüdantset toimet, viies vesiniku aatomi radikaali liikidesse;
- SET (Single Electron Transfer) meetodid, mis hindavad aine võimet vähendada vabu radikaale elektronide ülekandega.
Mõned kasutatud analüüsimeetodid on võimelised toimima mõlema mehhanismiga.
Siiani öeldu põhjal on selge, et antioksüdandi ja antiradiilsete võimete määramiseks välja töötatud testide arv on väga suur, nii et allpool piirdume lühidalt kõige levinumate ja olulisemate illustreerimisega, püüdes rõhutada nende tugevusi ja piiranguid .
